(一)样品处理

1.固体样品 无菌操作采取不同部位称取25g检样，加入灭菌生理盐水225ml中，制成混悬液。

2.液体样品 外包装擦拭灭菌后，吸取25ml检样，加入灭菌生理盐水225ml中，制成混悬液。(注：冰棍、冰激淋放在灭菌容器内，融化后立即检验)

3.特殊样品

(1)配有调味料的方便面：用无菌操作开封取样，将面块和全部调料及配料一起称量，按1：1加入灭菌生理盐水，制成检样匀质液，称取50g匀质液加至200ml灭菌生理盐水中，制成1：10稀释液。

(2)速冻预包装面米制品：用无菌操作开封取样，称取样品50g，加入灭菌生理盐水225ml中，置45℃水浴30分钟，化冻后立即进行检验。

(3)带壳干果食品、烘炒食品。用无菌操作开封取样，外壳消毒后无菌操作取出果肉，称取25g检样，加入灭菌生理盐水225ml中，制成混悬液。

(二)操作步骤及结果报告

1.菌落总数 根据食品卫生标准要求，选择2～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取1ml样品稀释液于灭菌培养皿内，每个稀释度做2个培养皿，将营养琼脂(46℃)注入平皿摇匀，同时将营养琼脂倾入加有1ml稀释液灭菌培养血作空白对照，待凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内增养48小时±2小时后观察结果。

结果报告：应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告结果，单位为CFU/g(ml)。有较大片状菌落生长的平板，不宜采用，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，可计算半个平板后乘以2代表全皿菌落数。平板内如有链状菌落生长时，若仅有一条链，可视为一个菌落，如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落。若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比来决定，若其比值小于或等于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字。若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告。若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告。若所有稀释度均无菌生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告。若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分>300或<30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告。

2.大肠菌群 根据食品卫生标准要求，选择3个适宜稀释度，每个稀释度做3管，36℃±1℃培养24小时±2小时，如有产酸产气管，接种EMB，置36℃±1℃培养18～24小时后，挑取可疑菌落1～2个进行革兰氏染色镜检，同时接种乳糖发酵管置36℃±1℃培养24小时±2小时做证实试验。

结果报告：如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产酸、产气管，根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表报告大肠菌群的MPN值。

3.真菌和酵母计数 根据食品卫生标准要求，选择3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取1ml稀释液于灭菌培养皿内，每个稀释度做2个培养皿，将孟加拉红琼脂(46℃)注入平皿摇匀，培养温度25～28℃，3天后开始观察结果，共培养观察5天。

结果报告：稀释度选择及菌落报告方式可参考菌落总数的报告。