1.公共场所空气细菌总数及结果报告

(1)撞击法:将采样后的营养琼脂平板置36℃±1℃恒温箱中、培养48小时后观察结果。根据仪器说明书计算每立方米空气中所含的细菌菌落数。以每立方米菌落数(CFU/m3)报告结果。

(2)自然沉降法:将采样后的营养琼脂平板置36℃±1℃恒温箱中、培养48小时后观察结果。计数每块平板上生长的菌落数,求出全部采样点的平均菌落数。以每平皿菌落数(CFU/皿)报告结果。

2.公共场所用品细菌总数及结果报告

(1)公共场所用品的采样方法

1)茶具:用浸有灭菌生理盐水的棉拭子在口唇按触处茶具内外缘涂抹50cm,采完后放入装有10ml灭菌生理盐水的试管中。

2)毛巾、床上卧具:用浸有灭菌生理盐水的棉拭子在样品对折后两面的中央各25cm内涂抹,采完后放入装有10ml灭菌生理盐水的试管中。

3)浴盆:用一浸有灭菌生理盐水的棉拭子在样品25cm2内涂抹,共采5个棉拭子放入装有125ml灭菌生理盐水的烧瓶中,每毫升的菌浓度相当于1cm2的菌量。

4)脸(脚)盆:用一浸有灭菌生理盐水的棉拭子在样品25cm2内涂抹,共采2个棉拭子放入装有50ml灭菌生理盐水的烧瓶中,每毫升的菌浓度相当于1cm2的菌量。

(2)操作步骤:将采样后的试管或烧瓶充分振摇,吸2ml分别注入2块灭菌平皿内,每1ml,如污染严重,可10倍递增稀释,倾入融化并冷至45℃营养琼脂后,置36℃±1℃培养48小时。

(3)结果报告:茶具细菌总数计算公式:细菌总数CFU/cm2=(平均菌落数×稀释倍数)/采样面积;毛巾、床上卧具细菌总数计算公式:细菌总数,CFU/25cm2=(平均菌落数×稀释倍数)/2;浴盆、脸(脚)盆细菌总数计算公式:细菌总数,CFU/25cm2=25×稀释倍数×平均菌落数

3.公共场所用品大肠菌群及结果报告

(1)发酵法:用测定细菌总数剩余的检样,倒入双料乳糖胆盐发酵培养液中。理发刀具吸取5ml检样倒入双料乳糖胆盐发酵培养液中。置36℃±1℃恒温箱中、培养24小时后观察结果。若产酸、产气,则转种EMB平板上,置36℃±1℃恒温箱中培养18~24小时后,观察菌落形态,并做革兰氏染色镜检,同时接种乳糖发酵管置36℃±1℃培养24小时做证实试验。如不产酸、不产气则为大肠菌群阴性,凡证实试验产酸、产气,革兰氏阴性无芽孢杆菌,即可报告检出大肠菌群。

(2)纸片法:将已采样的纸片置36℃±1察结果。按照纸片说明书报告结果。

4.公共场所理发刀具金黄色葡萄球菌

(1)操作步骤:将大肠菌群检测后剩余的5ml检样,放入45ml 7.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基中,置36℃培养24小时,接种Baird Parker培养基或血平板,置36℃±1℃培养24小时,挑取可疑菌落,涂片,革兰氏染色镜检。镜检为革兰氏阳性菌,排列成葡萄状,进行甘露醇发酵试验、血浆凝固酶试验。血浆凝固酶试验试管法:吸取1:4新鲜血浆0.5ml,放入灭菌小试管中,加入待检菌24小时±2小时肉汤培养物0.5ml。混匀,放36℃+1℃恒温箱或恒温水浴中,每半小时观察1次,24小时之内如果呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基0.5ml,分别加入灭菌1:4血浆0.5ml,混匀,作为对照。

(2)结果报告:参照化妆品金黄色葡萄球菌的报告方式。

5.公共场所拖鞋真菌和酵母菌的测定

(1)操作步骤:1:10检样充分振摇后,吸2ml分別注入2块灭菌平皿内,每皿1ml,选择3个适宜稀释度,倾入虎红琼脂后,置25~28℃培养,3天后开始观察,共培养观察7天。

(2)结果报告:通常选择菌落数在30~100之内的平皿计数,参照食品菌落总数的报告方式,计算公式:真菌菌落数,CFU/50cm2每皿的平均真菌菌落数×稀释倍数(注:采样面积为50cm2)。

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